紫锥菊提取多酚含量试验

紫锥菊在欧美各国被广泛用于免疫促进和调节剂，其预防和治疗各种感染性疾病的疗效得到越来越多临床医生的肯定。目前，紫锥菊植物在我国已成功引种并形成了一定的规模，紫锥菊提取物的市场应用于需求发展迅速，主要规格是4%紫锥菊多酚。本次实验中，源森生物对国内市售6批紫锥菊提取物进行检测对比，以期为客观评价国内紫锥菊提取物的质量提供依据。
一、市售紫锥菊提取物质量评价实验所需材料
安捷伦高效液相色谱仪；
安捷伦液质联用仪；
UV2401 PC紫外-可见分光光度计；
250W电脑型超声清洗机；
AE240电子分析天平。
绿原酸，没食子酸对照品；
乙腈，甲醇为色谱纯，水为超纯水，无水乙醇、无水碳酸钠为分析纯，福林酚试剂为实验试剂。
6批紫锥菊提取物市售产品(ZZJ-1~ZZJ-6) 购自包括源森生物国内6家生产商。
二、市售紫锥菊提取物质量评价实验方法与结果
（一）对照品溶液的制备
精密称取干燥至恒重的绿原酸对照品10.05mg，置50mL量瓶中，加入70%甲醇溶液少许，超声溶解，70%甲醇溶液定容至刻度，摇匀，得对照品贮备液，再精密移取5mL储备液，置 50mL量瓶中，70%甲醇溶液定容至刻度，即得对照品溶液（0.0201g.L-1）。
（二）供试品溶液的制备
平行取各批次紫锥菊提取物约1.2g，精密称定，分别置圆底烧瓶中，精密加入70%甲醇25mL，精密称定质量，热回流提取15min，冷却至室温，称量并以70%甲醇补足质量，摇匀，静置，取上清液，离心，取续滤液备用。
（三）相关峰的指认及美国药典HPLC方法的优化
1. 相关峰的指认
利用LC-MS同时参考文献［侯团章，中草药提取物.第1卷［M］.北京: 中国医药科技出版社，2004: 9.］中的相对保留时间，对各成分定性。色谱条件为Agilent ODS色谱柱(4.6mmx150mm,5μm)；液相方法为美国药典方法，但需要指出的是，需将流动相中不易挥发的磷酸替换为易挥发的甲酸。分别取6批供试品溶液2μL注入色谱仪，记录色谱图，见图1~3。液质TLC图未见紫锥菊苷，其中2个主峰分别为咖啡酸和菊苣酸。